什么是化學發光?
化學發光:在常溫下由化學反應產生的光,產生電子能級處于激發態的物質,后者通過躍遷釋放能量產生光子,從而導至的發光現象。化學發光是一個多步驟的過程。
化學發光按照發光時間可分為:
閃光(Flash): 發光時間在數秒內,如吖啶酯,以原位進樣和時間積分法測量。
輝光(Glow): 發光時間在數十分鐘以上,如:HRP-Luminol系統、AP-AMPPD系統、黃嘌呤氧化酶系統,無須原位進樣,以速率法測量。
什么是化學發光免疫分析?
化學發光免疫分析(CLIA) 誕生于1977年,是近十年來在世界范圍內發展非常迅速的非放射性免疫分析,將高靈敏的化學發光技術與高特異性的免疫反應結合起來建立的微量測定技術,因此該技術靈敏度高、線性范圍寬、應用范圍廣。
根據發光體系的不同進行分類,可將化學發光分為:化學發光免疫分析、化學發光酶免疫分析、電化學發光免疫分析法、光激化學發光免疫分析。
化學發光免疫分析(直接化學發光)
化學發光免疫分析(CLIA),用化學發光試劑直接標記抗體或抗原的一類免疫檢測方法。
魯米諾類標記的化學發光免疫分析:魯米諾類物質的發光為氧化反應發光。在堿性溶液中,魯米諾可被許多氧化劑氧化發光,其中H2O2最為常用。
吖啶酯類標記的化學發光免疫分析:吖啶酯在H2O2和OH-條件下,能迅速發光,吖啶酯衍生物標記效率高且穩定性好,因此吖啶酯作為標記物用于免疫分析,發光體系簡單、成本低,具有較低本底且能快速檢測。
化學發光酶免疫分析(酶促化學發光)
化學發光酶免疫分析(CLEIA)屬酶免疫分析,只是酶反應的底物是發光劑。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP )和堿性磷酸酶(ALP)。
電化學發光免疫分析
電化學發光免疫分析(ECL)是指由電化學反應引起的化學發光過程。ECL的反應在電極表面進行,發光底物為三聯吡啶釕,以三丙胺(TPA)來激發光反應,它包括電化學和化學發光兩個過程。ECL的突出優點:標記物非常穩定;發光時間長、靈敏度高、線性范圍寬、反應時間短。